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诊断软组织和骨肿瘤
  • 　　软组织和骨肿瘤是罕见的恶性肿瘤，其占所有肿瘤的约2％。由于这种低发病率，STB肿瘤患者通常被称为专家肉瘤中心，根据完善的方案和最新发展，多学科团队可以执行诊断程序和治疗。原发性STB肿瘤的临床诊断依赖于影像学检查和充分的活检。成像，特别是计算机断层扫描和磁共振成像，可以深入了解STB肿瘤的位置，大小，边缘，组织成分和异质性。虽然细胞学已经应用于少数肉瘤中心，STB肿瘤的主要诊断通常在组织学活组织检查上进行，这些恶性肿瘤在形态上是异质的，并且几种组织学类型具有重叠的微观特征。对于STB肿瘤的结论性诊断，通常需要进行额外的免疫组织化学和分子病理学，聚合酶链反应和下一代测序，需要特殊的专业知识。
    　　 STB肿瘤的分型和分级是治疗决策的必要条件。在临床背景下，和大多数其他肉瘤团队中，细胞学仅适用于特定病例。首先，在确诊原发性STB肿瘤的病例中，细胞学可以有效地用于诊断复发性或转移性肉瘤。其次，对于深部STB肿瘤，细胞材料可通过细针穿刺在内窥镜超声期间或通过支气管内超声引导的经支气管针抽吸收集。与组织活检相比，使用细针抽吸更容易对不同肿瘤区域进行采样，这可以提高诊断准确性，特别是在处理具有临床成像异质特征的STB时。
    　　 可以使用几种不同的细胞块方法来处理由此收集的细胞材料。作为常规制备的涂片或细胞沉积物的辅助手段，细胞阻滞技术允许应用IHC和分子方法，扩展诊断设备。已经使用了CellientTM自动细胞块系统，通过该cytotechnicians可以在1小时内使自动细胞块，尽管具有比传统的单元块的技术更高的成本。使用CellientTM在优化IHC方案后，可以使用甲醇固定代替福尔马林，将广泛的诊断上重要的抗体应用于IHC。在临床细胞学中，CellientTM方法已成功用于表征浆液和FNAC材料中的肿瘤细胞，例如，用于表征不同的癌类型或诊断转移性黑素瘤。
    　　 从出国看病服务机构病理科的细胞学实验室的档案中检索了2013年至2016年期间使用处理器处理的软组织和骨肿瘤的吸出细胞样本。研究人员的队列包括20个连续病例，2个EUS指导的深部肿瘤和9个FNAC浅表病变标本的吸入。用EProCore针进行除EUS引导的所有引导之外的所有引导。在所有EUS程序和大多数FNAC愿望中，研究人员的细胞技术人员在现场检查了样本细胞性，并且在细胞数低的情况下，进行了重复的吸入。该研究队列包括16个软组织肿瘤病例和4个骨肿瘤病例。为了评估诊断性能，将该组分为2组，8个原发病灶和12个继发性病变。
    　　 在被加载到Cellient之前TM处理器，材料在洗涤TM洗净，以1000g离心5分钟，溶解在流体并固定20分钟。一滴细胞沉淀物用于制备吉姆萨染色的涂片。将6滴细胞沉淀物中洗涤20分钟，这是一种用于裂解红细胞并溶解粘液的低剂量甲醇溶液。从该沉积物中，用处理器制备染色的微观薄层载玻片。将剩余部分的细胞悬浮液在溶液中冲洗两次，并再次以1200g离心5分钟，之后将沉淀物用流体固定20分钟，然后将具有的样品瓶放入自动化装置中。自动化细胞块系统是完全自动化的。它通过受控真空在小于1小时内产生石蜡包埋的细胞块，将一层细胞浓缩在专门设计的过滤器上。将脱水和澄清试剂真空抽吸通过样品，随后将其包埋在石蜡中并在另外的石蜡层中完成;这使它为组织学切片做好了准备。真空辅助过滤浓缩最终石蜡块内的可用细胞。曙红染色用于切片期间细胞层的可视化。在切片CellientTM期间制备10个4mm厚的石蜡切片，并将它们固定在涂有氨基丙基三乙氧基硅烷的显微镜载玻片上。一节常规用苏木精和曙红染色，用于显微镜评估标本细胞性。其余未染色的载玻片可用于IHC。
    　　 应用了14种抗体，包括其商业来源，克隆和工作稀释度。在研究中评估了5种诊断相关的抗体。用于诊断该组中STB肿瘤的另外9种抗体是肌动蛋白，B-连环蛋白，brachyury，caldesmon，CD-34，结蛋白，DOG-1，myf4和SATB2。使用Ultraview检测系统在自动免疫染色仪中进行所有IHC染色，并通过测试抗体的适当稀释，需要CC1抗原检索进行验证，并且需要在IHC中进行8分钟扩增步骤染色方案。用至少3种不同的CellientTM细胞块测试了所有抗体，所述CellientTM细胞块由3种不同的样品制备。将用细胞块获得的IHC结果与使用来自相同患者的相应福尔马林固定，石蜡包埋组织肿瘤材料作为参考标准获得的IHC结果进行比较。几种抗体需要用CC1进行抗原修复以获得最佳染色。经蛋白酶预处理的CC1证明可获得细胞角蛋白抗体AE1-3的最佳结果。对于所有IHC染色，使用VentanaUltraviewDAB检测试剂盒，扩增步骤为8分钟。苏木精用作复染剂。
    　　 在所有20个病例中，CellientTM材料的H＆E染色切片含有小组织碎片。这些小组织碎片的H＆E组织学显示，可以正确检查诊断相关的组织学和细胞学特征。硬纤维瘤病的片段由胶原丰富的组织与随意布置成纤维细胞与圆形核，核仁，以及锥形胞浆嗜酸性。2级粘液样软骨肉瘤的片段包含肿瘤细胞，中度非典型，染色质单核和双核包埋在软骨细胞基质中，而在未分化的多形性肉瘤和辐射肉瘤。在8个原发性肿瘤组中，研究人员通过CD117和DOG-1的阳性IHC特异性诊断出5个梭形细胞胃肠道间质瘤。肌动蛋白，结蛋白和HMB-45阳性IHC后可诊断直肠PEC瘤，家族性腺瘤病多发性息肉病综合征患者的肠系膜硬纤维瘤病显示B-catenin的局灶性核阳性，而腹膜后平滑肌肉瘤则为诊断为它表现出平滑肌标记肌动蛋白，结蛋白和caldesmon的表达。在所有原发性STB肿瘤中，在材料上进行的IHC提供了临床上重要的信息。
    　　 在已知STB原发性的12个继发性肿瘤组中，研究人员设法确认在所有病例中存在局部复发或转移。该组包括4个骨肉瘤。骨肉瘤的转移为SATB2阳性，2个继发性软骨肉瘤显示S-100的表达，而骶骨脊索瘤的腹股沟淋巴结转移通过IHC证实转录因子。软组织肉瘤的8个次要表现包括2个放射性肉瘤和2个多形性未分化肉瘤，2个转移性肺泡横纹肌肉瘤，子宫转移性平滑肌肉瘤和复发性皮肤纤维肉瘤突起。除了H＆E形态，在两组中，IHC结果使Cellient载玻片与在FFPE肿瘤活组织检查中获得的那些或来自同一患者的切除/切除一致。
    　　 CellientTM是一种全自动设备，可在1小时内根据标准化协议生成细胞块。这允许在样本到达实验室的同一天而不是第二天进行快速诊断，这在选定的情况下是方便的。使用基于甲醇的溶液代替福尔马林。提到材料的细胞性至少与传统细胞块相当，而细胞形态细节，特别是染色质结构似乎更好。优点和常用的细胞块的方法，细胞块通常含有小的组织片段。除了组织学特征的H＆E解释之外，还可以应用IHC和分子方法，例如FISH或NGS。在细胞学实验室中，免疫染色可应用于细胞涂片，ThinPrep标本，细胞离心涂片标本和细胞块。在英国NEQUAS质量控制研究中，测试常用的抗体用于诊断癌，间皮瘤，黑色素瘤和淋巴瘤，发现最高的敏感性由细胞块提供，其次是细胞离心涂片标本，基于液体的细胞学载玻片，以及细胞涂片。尽管细胞DNA和RNA通过甲醇固定得到很好的保护，但在蛋白质水平上，必须优化和验证常规用于FFPE材料的IHC方案。已经使用自动化免疫染色剂广泛测试了许多针对材料的不同抗体。在2013年发现IHC在上进行细胞块可用于诊断算法，证明有助于区分主要肿瘤类型，癌症亚型的鉴别，在转移癌病例中确定原发肿瘤部位。值得注意的是，在连续100例病例中，25％的浆液标本和29％的FNA标本获得了额外的临床相关信息。
    　　 这是关于使用的第一份报告细胞块用于诊断软组织和骨肿瘤。在和大多数肉瘤中心，细胞学很少用于诊断软组织和骨骼肿瘤。对于该系列中的肿瘤，EUS-FNA试图诊断为深部原发性肿瘤，FNA用于表面定位的转移性或复发性肿瘤，其组织学诊断已知。通过结合临床表现，H＆E形态学和IHC，可以对所有连续20例软组织和骨肿瘤进行诊断。研究人员评估了14种抗体，其中9种未在研究人员的初始研究中进行过测试。在优化影响IHC结果的因素后特别是抗原修复条件，在检测系统试剂盒中的扩增步骤中，研究人员设法获得了细胞质以及核抗原的优异染色结果。在应用IHC的所有16例中，可以进行特定诊断。例如，brachyury，myf4和SATB2分别作为脊索，肌原性和成骨细胞分化的标志物，允许或确认脊索瘤，肺泡横纹肌肉瘤和骨肉瘤的诊断。可以做出具体的诊断。
    　　 成本考虑和预算限制将决定细胞学实验室使用快速自动化处理或更耗时的传统手动FFPE方法为H＆E，IHC或FISH制备细胞块的程度。技术的成本包括购买和试剂。尽管阻滞技术的成本高于传统细胞阻滞技术，但研究人员估计每个样本节省的技术人员时间为30分钟，使用准备琼脂细胞块作为参考标准所需的时间。新的实验室技术的成本应根据患者医疗保健的总成本来判断，包括减少其他诊断测试和节省的患者生命年，
    　　 使用处理器处理的细胞材料的常规H＆E染色和IHC具有准确诊断软组织和骨的肿瘤的潜力。在所有连续20例病例中，提供了重要的临床信息，这些信息转化为改善的患者护理。由于样本量小，统计分析不可行，并且需要在大量病例中测试适当抗体的未来研究来评估该方法的实际价值。
 
出国看病概况

海外医疗在国外发展较为成熟，比如在欧美等医疗技术发达国家，很多医院都设有国际病人办公室并配备多语种医学专业翻译人员，就医流程和模式都已相对成熟。在国内，海外医疗虽然还属于新兴行业，但发展势头迅猛，发展潜力巨大，市场前景广阔。
　　 从中国经济发展水平和消费能力预测，未来10年时间，海外医疗市场及其相关产业的市场的巨大潜力，有可能超过数百亿美元。
出国看病适应症
靶向药物
 

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